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流式细胞仪检测细胞凋亡需要多少体积的细胞

1.收集细胞{数目约(1~5)×10 6个/mL},500 1000 r/min离心5min ,弃去培养液. 2.3mlPBS洗涤1次. 3.离心去PBS,加入冰预冷的70% 的乙醇固定,4℃,1—2小时. 4.离心弃去固定液,3mlPBS重悬5 min. 5.400目的筛网过滤1次,500—10 00r/min离心5min,弃去PBS...

不会的。 有取样误差,机器的系统误差等等。而且发生凋亡的细胞,尤其是早期的,MTT检测还会是存活细胞。

一、原理 在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期,细胞膜中的磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V是一种分子量为35~36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力,故可通...

已经做完流式,看到结果却不知该怎样分析了。我用的是AnnexinV-FITC 凋亡试剂盒 ,AnnexinV/PI双染检测细胞凋亡。请教各位,凋亡散点图中第1,2,4象限到底分别代表什么细胞?手里的资料说法都不相同。试剂盒说明书:1代表细胞收集过程中机械性...

PBS是一种缓冲液,他的渗透压与一般细胞的相同,在做细胞试验或者活体组织实验中,一般就把PBS当做水来用,各种冲洗的过程什么的都是用它。这样不会改变细胞形态~

PI 单染并不是很好的看凋亡的方法。一般可以作为早期的筛选实验,因为特异性不好 方法和做细胞周期是一样的,你可以查一下做细胞周期的实验方法,我这里就不贴了。 几点注意: 一定要设置单细胞gate,以防多聚细胞核杂质的干扰 RNA酶不要忘记了 ...

每种药物是不同的,如果你不能确定时间点,需要做一个时间曲线。给一组细胞用药后,每隔一段时间取一个样本检测,得到凋亡开始发生的时间点。然后再测不同浓度的药物在这个时间点所引起凋亡的程度。

第一,要保证有正确的对照组 第二,要保证操作正确 第三,把你的结果贴上来,才好分析啊

用PI单染就可以,PI是用来测细胞周期的,在单倍体峰前如果有个亚峰则表明有凋亡,但是这个方法不是很好,坏死细胞也会包含在内。准确地说用PI单染测出的凋亡率应该是死亡细胞占细胞总数的比例。建议用AnexinV和PI双染,PI阴性和AnexinV阳性区是...

要计数的话,就流式最好了。 检测凋亡,除非是悬浮培养的细胞,一般都要染色。活细胞可以用caspase的底物染色,有配套试剂盒,是最简便快捷的方法,而且特异性好

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