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检测细胞凋亡

一、形态学观察方法 1、HE染色、光镜观察:凋亡细胞呈圆形,胞核深染,胞质浓缩,染色质成团块状,细胞表面有“出芽”现象。 2、丫啶橙(AO)染色,荧光显微镜观察:活细胞核呈黄绿色荧光,胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内...

一、原理 在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期,细胞膜中的磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V是一种分子量为35~36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力,故可通...

1.收集细胞{数目约(1~5)×10 6个/mL},500 1000 r/min离心5min ,弃去培养液. 2.3mlPBS洗涤1次. 3.离心去PBS,加入冰预冷的70% 的乙醇固定,4℃,1—2小时. 4.离心弃去固定液,3mlPBS重悬5 min. 5.400目的筛网过滤1次,500—10 00r/min离心5min,弃去PBS...

1) PS(磷脂酰丝氨酸)在细胞外膜上的检测:PS从细胞膜内侧转移到外侧在细胞受到凋亡诱导后不久发生,可能作为免疫系统的识别标志。AnnexinV,一个钙依赖性的磷脂结合蛋白,能专一性的结合暴露在膜外侧的PS,再通过简单的显色或发光系统进行检测...

除了上述的操作步骤,还有一个必须注意的,就是对照。阴性对照,阳性对照,还有调节通道的,只加PI,只加AV,这些都要设计好,要不测出来的值不可信。 细胞接种后,每日计数细胞数,连续观察7-10日,在对数坐标纸上绘制细胞生长曲线,确定曲线基...

我是生物领域的,就生物实验外包而言,对于实验外包公司,他们能够充分利用手中的技术及市场信息资源,利用较小的成本,完成不同单位的课题项目,避免了不同单位采购不常用设备的花费,和试剂耗材的浪费。因此对于一些研究条件比较差的实验室来...

台盼蓝(Trypan Blue)是检测细胞膜完整性最常用的生物染色试剂。健康的正常细胞能够排斥台盼蓝,而死亡的细胞,膜的完整性丧失,通透性增加,细胞可被台盼蓝染成蓝色。依据此原理,细胞经台盼蓝染色后,可通过显微镜,直接镜下计数或拍照后计数,...

流式细胞检测凋亡的原理和染色方法有好多种呢,有的只要单色,不需要设置补偿。 只有使用PI+Anexin V 这种双色实验才需要。不过这个实验特异性很差,不建议使用,因为健康细胞结果刮取或者胰酶消化后很容易出现假阳性。 调节补偿,和其他多色流...

凋亡试剂盒~早期凋亡晚期凋亡~镜检细胞核破碎DAPI染色~WB检测PARP断裂~Caspase3、8、9酶活上升~

哥们,大学翟中和版的细胞生物学里面就有,很全很详细,似乎就在讲癌细胞的那一章,你去翻翻看,不会让你失望的

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